Синтез гликопептидов|Гликозилированные пептиды|О-Связанные гликопептиды|N-связанные гликопептиды|Наука-Пептид

 

Мета-описание

 

Нужны гликопептиды для гликобиологических исследований или мимикрии гликопротеинов? Наука-Услуга синтеза пептидов гликопептидов охватывает O-связь, N-связь и введение сложных гликанов. 20-летний опыт, точный контроль сайтов гликозилирования. Пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам.

 

Гликопептиды: имитация реального-мирового гликозилирования

 

Зачем вы принимаете гликопептиды?
Белки редко остаются «голыми» в организме, - большинство из них содержат сахара. Гликозилирование влияет на сворачивание белка, стабильность, распознавание и передачу сигналов. Если вы хотите изучить функцию гликопротеина или разработать антитело против эпитопа гликана, недостаточно иметь голый пептид, необходимо присоединить гликаны.

 

Трудность синтеза гликопептидов заключается в сложной структуре самой гликановой цепи и необходимости обеспечения правильного места и целостности гликановой цепи при присоединении к пептиду; С конъюгацией O- все в порядке, но цепи гликанов, конъюгированных с N-, намного длиннее, что удваивает сложность синтеза. Мы уже бывали в таких ямах и знаем, как их обойти.

page-800-600

 

Что мы можем сделать

 

1. Тип гликозилирования: создаются как O-, так и N-связи.

Тип

Способ подключения

Общие гликоконъюгаты

Мы сталкивались с ситуациями, когда

О-связанные гликопептиды

Сахар-связан с гидроксильной группой цепи Ser/Thr на стороне-цепи

ГалНАк, GlcNAc, Гал, Человек

Я превратил моносахариды в пентасахариды, и у меня стабильный выход.

N-связанные гликопептиды

Сахар-связан с амидом боковой-цепи Asn

GlcNAc, тип с высоким содержанием маннозы, сложный тип

Самый длинный срок, который я когда-либо делал, — это девять сахаров, что требует особых стратегий защиты.

Закисление слюны

с сиаловой кислотой в конце

имитируя естественные сайты узнавания гликопротеинов

Сиаловая кислота легко выводится. Мы оптимизировали условия

 

В зависимости от целей вашего исследования мы подберем, какая стратегия гликозилирования является наиболее подходящей. Первым шагом в синтезе гликопептидов является выбор правильной сахарной цепи и связи.

 

2. Длина сахарной цепи: от моносахаридов до сложных сахарных цепей.
Модификации моносахаридов: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal и т. д., самые простые и успешные.
Дисахариды/трисахариды: например, лактоза, хитозан, должны быть хорошо защищены донорами гликозила.
Сложные сахарные цепи: с высоким содержанием маннозы, сложные N-гликаны, до девяти сахаров.
Сиалилирование: концевая связь с сиаловой кислотой имитирует сайт узнавания природных гликопротеинов.

 

3. Контроль точек: точность, никаких догадок
Какой самый большой страх перед гликозилированием? Гликоконъюгация не в том сайте, или один сайт связан, а другой нет. С помощью нашей стратегии ортогональной защиты мы можем осуществить гликозилирование в определенном сайте и оставить нетронутыми другие сайты. Необходимо гликозилировать несколько сайтов? Мы можем вводить их один за другим и четко контролировать.


4. Чистота: в зависимости от экспериментальных требований.

Уровень чистоты

Применимые сценарии

Обычный чистый (85-95%)

Сочетание экспериментального и активного первичного скрининга

Высокая чистота (95-98%)

клеточные эксперименты, функциональная проверка

Ultrapure (>98%)

структурные исследования, ЯМР, кристаллография

 

Каждый гликопептид сопровождается отчетами ВЭЖХ и МС с данными, подтверждающими целостность гликановой цепи и правильность сайта.

 

5. Другие модификации гликопептидов.
Гликопептиды сами по себе достаточно сложны, но некоторые эксперименты требуют чего-то еще:
Флуоресцентная маркировка: FITC, TAMRA, отслеживание назначения гликопептидов.
Биотин: выполните-опускание или проверьте.
Фосфорилирование: одновременное моделирование гликозилирования и фосфорилирования для изучения перекрестных помех.
Мечение изотопов: для количественного определения ЯМР или масс-спектрометрии.

 

Почему стоит выбрать нашу услугу синтеза гликопептидов?

 

1. Гликохимия + синтез пептидов, двух-подход.
Синтез гликопептидов сложен, поскольку он пересекает две области - гликохимии и синтеза пептидов. Те, кто производит сахар, могут не знать пептиды, а те, кто производит пептиды, могут не знать сахар. У нас есть люди с обеих сторон, мы сами готовим донор гликозила, сами оптимизируем условия гликозилирования, нам не нужен аутсорсинг, и мы можем сами решить проблемы.

 

2. Гибкие стратегии защиты и целостность сахарной цепочки.
Во время гликозилирования сама сахарная цепь должна быть защищена, иначе условия реакции выбьют сахар. У нас есть различные комбинации защитных групп, которые могут стабилизировать сахарную цепь в условиях синтеза пептидов, а затем оставить сахар нетронутым, когда на последнем этапе с него снимают защиту.

 

3. Управление сайтом: подключайтесь где угодно
Гликозилирование в одном месте: сахар вводится в определенное место и остается незатронутым в другом месте.
Многосайтовое гликозилирование-: разные сайты могут нести разные сахарные цепи, которые можно вводить одну за другой, не мешая друг другу.
Избирательное гликозилирование: существует несколько Ser/Thr, только один из них гликозилируется -, что достигается за счет стратегии сохранения, а не вероятности.

 

4. КК: Цела ли сахарная цепочка? Сайты правильные?
Гликопептиды более сложны для контроля качества, чем обычные пептиды:

Молекулярная масса MS: посмотрев на нее, можно определить, прикреплен ли сахар или нет.
МС/МС, чтобы увидеть сайт (необязательно): разбейте пептид, чтобы увидеть, к какой аминокислоте присоединен сахар.
ВЭЖХ, чтобы увидеть чистоту: Также обратите внимание на примеси дешугаризации.
Анализ состава сахара: измерение состава и связей сахарной цепи при необходимости.
Вам предоставлены данные по каждому гликопептиду, поэтому вам не придется гадать.

 

5. От миллиграммов до ста миллиграммов, вплоть до конца
Миллиграммы на этапе скрининга, десять миллиграммов на этапе проверки, сто миллиграммов на структурном исследовании - мы можем взять все это. Тот же проект, тот же аналог, нет необходимости в повторной-гармонизации.

 

Для чего можно использовать гликопептиды?

 

Области исследований

Общее использование

Тип гликозилирования

Гликобиология

Изучение того, как белки,-связывающие сахар, распознают сахар

О-соединение, N-соединение

Разработка антител

скрининг антител против эпитопов гликанов

сложные сахарные цепи, подкисление слюны

Разработка вакцины

антигены сахароконъюгированных вакцин-

повторяющиеся звенья сахара, гликопептидное соединение

вирусные инфекции

имитирующие вирусные поверхностные гликопротеины

N-связанный тип с высоким содержанием маннозы

Маркеры опухолей

аномально гликозилированные пептиды

короткоцепные-О-сахара

сигнальные пути

механизмы, с помощью которых гликозилирование влияет на функцию

Модификация моносахаридов

структурная биология

ЯМР или кристаллические структуры гликопротеинов

гомогенные сахарные цепи, изотопная маркировка

 

Структурная биология ЯМР/кристаллическая структура гомогенных сахарных цепей гликопротеинов, изотопная метка

 

Доставка и контроль качества

 

  • Доставка: Лиофилизированный порошок, в центрифужных пробирках или флаконах, защищенных азотом.
  • Сопроводительные документы: Сертификат подлинности (профиль ВЭЖХ + профиль МС), МС/МС (подтверждение сайтов гликозилирования).
  • Дополнительные тесты: содержание пептидов, эндотоксинов, влаги, анализ состава сахара.
  • Индивидуальная упаковка: порционирование и маркировка в соответствии с вашими требованиями.
  • Каждый продукт гликопептидного синтеза дважды-проверяется перед отправкой, чтобы убедиться в полноте сахарной цепи и правильности сайтов.
page-800-1067
page-800-1067
page-800-1067

 

Три реальных-случая из жизни

 

Случай I: Институт гликобиологии

Для исследования распознавания лектинов заказчику необходим О-связанный гликопептид, который прикрепляется к GalNAc в определенном месте. Мы использовали твердофазный синтез+гликозилирование и модификацию и, наконец, МС/МС подтвердили, что гликопептид был присоединен к указанному серу. Заказчик использовал этот гликопептид для SPR и получил константу связывания.

Случай 2: Программы вакцинации транснациональных фармацевтических компаний

The customer needed a batch of N-linked glycopeptide with high mannose-type sugar chain for anti-HIV vaccine research. We prepared the glycosyl donor by ourselves, optimized the glycosylation conditions, and delivered the final batch of N-linked glycopeptides with intact glycan chains and purity >95%, поэтому последующие эксперименты по иммунизации заказчика прошли гладко.

Случай 3: Исследование опухолевых маркеров в национальном университете

Заказчику требовался гликопептид, содержащий сиалированный антиген T-, чтобы имитировать аберрантное гликозилирование на поверхности опухолевых клеток. Мы ввели сиалилированный GalNAc и позаботились о том, чтобы сиаловая кислота не терялась в процессе синтеза. Клиент использовал этот гликопептид для выявления специфических антител.

 

А как насчет ваших потребностей в гликопептидах?

 

Мы можем обсудить, нужны ли вам простые гликопептиды, модифицированные моносахаридами, или сложные N-связанные гликаны. По крайней мере, вам не придется искать кого-то с обеих сторон, когда вы попросите Science-Peptide провести синтез гликопептидов.

 

Мне нужно, чтобы ты сказал мне:
пептидные последовательности
Сайты гликозилирования и структуры сахарных цепей (лучше всего использовать ссылки)
Сколько (миллиграммы)
требования к чистоте


Когда ты этого хочешь?
Дайте вам технико-экономическое обоснование и предложение в течение 24 часов.