Экстракция окситоцина: возьмите 100 г высушенного порошка *Pterocarya stenoptera* и 30 г кварцевого порошка, поместите их в шаровую мельницу, добавьте дистиллированную воду и экстрагируйте четыре раза, используя тот же метод. Количество добавляемой дистиллированной воды составляет 1,4 л дважды и 1,3 л дважды. Каждая экстракция длится 45 минут, после чего следует центрифугирование. Соберите жидкость и снова извлеките остаток. Объедините четыре экстракта, чтобы получить раствор окситоцина. То есть: высушенный порошок *Pterocarya stenoptera* [вода, шаровая мельница] → экстракт окситоцина (хроматографическое разделение).
Добавьте 1500 г предварительно-обработанного синтетического цеолита к 20 л 0,25 % раствора уксусной кислоты, перемешайте и вылейте в обменную колонку. Когда раствор уксусной кислоты упадет на 2-3 см над поверхностью цеолита, добавьте экстракт. Соберите белую мутную жидкость (в основном содержащую окситоцин из-за его pI 7,7, тогда как вазопрессин имеет pI 10,9, что позволяет легко адсорбировать его в виде положительных ионов) при соответствующей скорости потока. Когда уровень экстракта упадет до поверхности цеолита, немедленно добавьте дистиллированную воду и продолжайте собирать мутную жидкость до тех пор, пока вся жидкость не вытечет. Мутный раствор доводили до pH 3,5 ледяной уксусной кислотой, быстро нагревали до 95 градусов на водяной бане и выдерживали в течение 3 минут, затем быстро охлаждали и оставляли в холодильнике на ночь. Процесс был следующим: экстракт окситоцина [HAc, колонка с синтетическим цеолитом] → мутный раствор [HAc, нагретый] → раствор для разделения (адсорбция, элюирование). На следующий день охлажденный раствор фильтровали и к фильтрату при перемешивании добавляли 10% бентонитовую взвесь (3 мл на 100 мл). Адсорбцию проводили в течение 1 часа с последующим центрифугированием. Супернатант проверяли тест-раствором сульфосалициловой кислоты; отсутствие осадка указывает на полную адсорбцию. Если происходила неполная адсорбция, адсорбцию повторяли и два осадка бентонитовой суспензии объединяли. Бентонит элюировали четыре раза 1% уксусной кислотой (1,6 л, 1,4 л, 1,2 л и 0,8 л соответственно). Каждый элюент нагревали до 80 градусов, добавляли хлорбутанол, температуру повышали до 95 градусов, затем быстро охлаждали до 25 градусов. Элюенты фильтровали или центрифугировали и четыре фильтрата объединяли для определения активности и предела вазопрессина. То есть подготовка охлажденной жидкости [фильтрация] → фильтрат [суспензия мыльной глины] → адсорбент [1% HAc] → введение элюента окситоцина.
