Ретатрутидные примеси

Ретатрутидные примеси|Справочник по примесям ритаглутида|Пользовательский синтез примесей и проверка структуры|Наука-Пептид

Контроль примесей ритаглутида - для разработки аналитических методов, исследований качества, подачи непатентованных лекарств. Science-Peptide обеспечивает индивидуальный синтез примесей, связанных с ритаглутидом, включая недостающие пептиды, окисленные примеси, выпадения жирных кислот, димеры и т. д., с данными подтверждения структуры для поддержки ваших исследований профиля примесей. Добро пожаловать, свяжитесь с нами. Добро пожаловать, свяжитесь с нами.

Ретатрутидные примеси (ретатрутид), триагонист GLP-1/GIP/глюкагон, были на пике популярности в последние два года, и его эффект на потерю веса даже более яростный, чем у симеоглутида. На него смотрят отечественные компании-генерики пептидов, срок действия патента истекает, кто первым захватит первый дженерик, тот сможет съесть большую часть рынка.

 

Однако для производства непатентованных лекарств ключевым моментом являются качественные исследования. Анализ спектра примесей, продукты для контроля примесей, валидация метода — все это не может отсутствовать в регистрационной информации. Ретаротид представляет собой крупный пептид с 39 аминокислотами и двумя боковыми цепями жирных кислот. В процессе синтеза может образовываться больше примесей, чем в обычных пептидах - недостающие пептиды, окисленные примеси, димеры, продукты выделения жирных кислот, каждый из которых необходимо уточнить.

 

Мы в Science-Peptide накопили большой опыт синтеза сложных пептидных примесей. У нас есть набор процессов подготовки примесей специально для длинноцепочечных модифицированных пептидов, таких как ритаглутид. Мы можем настроить синтез различных средств контроля примесей ритаглутида в соответствии с вашими потребностями, с данными структурного подтверждения, и помочь вам разработать метод, чтобы у вас было четкое представление при подаче заявки.

Ритаглутид — крупная молекула, процесс синтеза сложен, источник примесей также сложен. Когда мы проводим исследования примесей, мы в основном сосредотачиваемся на следующих категориях:

Отсутствует пептид
Недостаточное-связывание одной или нескольких аминокислот во время синтеза является наиболее распространенной технологической примесью. Различные положения недостающего пептида имеют разную полярность и их необходимо локализовать с помощью ВЭЖХ. Например, если отсутствует лизин в положении 15 или отсутствует аминокислота на конце цепи жирной кислоты, время удерживания совершенно другое, но без контроля вы не знаете, какой пик.

Окисляющие примеси
Мет легко окисляется до сульфоксида, что меняет его полярность и влияет на тест на чистоту. Поскольку Met присутствует в последовательности ретаротида, окисленные примеси являются важным элементом контроля. Иногда через некоторое время появляются пики окисления, поэтому нам нужно следить за этим.

Димеры/полимеры
Во время синтеза или хранения две или более молекул соединяются дисульфидными связями или не-ковалентными взаимодействиями и являются ключевыми примесями в веществе. Удвоение молекулярной массы димера часто является большим пиком при ВЭЖХ и его необходимо контролировать.

Продукты, выделяющие жирные кислоты
Ретаротид несет две боковые цепи жирных кислот (например, октадекандиовой кислоты), и эта модификация может быть частично удалена во время синтеза или хранения, что приводит к удалению примесей жирными кислотами. Структура этого типа примеси настолько отличается от основного пика, что для его локализации требуется специальный контроль. Мы столкнулись с клиентом, который проводил исследования стабильности: после месяца хранения появился пик, а затем мы обнаружили, что содержание жирных кислот упало на половину пика.

Дезаминированные примеси
Аспарагин (Asn) и глутамин (Gln) легко деамидируются в кислых или нагреваемых условиях с образованием изомеров. Эти примеси часто обнаруживаются в ходе испытаний на принудительное разложение, и их следует контролировать.

Диастереоизомеры
Во время синтеза длинной-цепи отдельные аминокислоты могут подвергаться рацемизации, что приводит к образованию диастереоизомеров, которые необходимо обнаруживать с помощью хиральной хроматографии или специальных методов. Хотя содержание обычно невысокое, эксперты спросят об этом, когда оно будет объявлено.

Многие из этих примесей недоступны на рынке, и их необходимо синтезировать по индивидуальному заказу. Мы выполнили множество проектов по персонализации примесей ритаглутида и охватили вышеуказанные категории.

Удаление пептидного ряда
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 15 is missing, or the amino acid at the end of the fatty acid chain is missing. We can synthesize them according to your impurity profile, and the purity is usually >95% с рассеянным склерозом. Клиент попросил нас синтезировать набор из 12 недостающих пептидов от N-конца до C-конца, и мы сделали их все.

Окисляющие примеси
Met in Retarotide is oxidized to sulfoxide, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the control product in oxidized state. The purity of the product is >95%, и мы можем предоставить МС-спектр для подтверждения степени окисления. Окисление — это постепенный процесс, и мы можем добиться преобладания сульфоксида с небольшим количеством побочных-продуктов.

Димер
Димеры, образованные в результате поперечной-сшивки или не-ковалентного взаимодействия, могут быть получены различными методами, выделены и очищены для обеспечения контроля высокой чистоты. Молекулярная масса димера в два раза больше основного пика, известного методом МС. Некоторые клиенты просили димер для проверки метода, и мы предоставили им чистоту 98%.

Продукты, выделяющие жирные кислоты
Это примесь, специфичная для Ретарутина. Цепи жирных кислот могут быть частично разорваны или полностью отсоединены, что приводит к образованию ряда сопутствующих примесей. Мы можем синтезировать различные варианты жирных кислот с отсутствующими или укороченными жирными кислотами, чтобы помочь вам определить местонахождение этих примесей. Самым сложным случаем, который мы когда-либо делали, был случай, когда клиент попросил нас синтезировать вариант цепи жирной кислоты с отсутствующими шестью атомами углерода, и мы это сделали.

Дезаминированные примеси
Для сайтов Asn и Gln в последовательности мы можем подготовить дезамидированные контрольные примеси путем принудительной деградации или целевого синтеза. Разница в молекулярной массе после дезамидирования составляет всего 1, поэтому отличить их по МС непросто, и необходимо использовать специальные хроматографические условия, подобрать которые мы умеем.

Другие индивидуальные примеси
Если в ходе ваших исследований вы обнаружите новую неизвестную примесь, мы можем помочь вам проанализировать структуру и синтезировать ее. Отправьте нам образец, мы проведем анализ ЖХ-МС, оценим структуру, затем направленный синтез, а затем сравним время удерживания и масс-спектр, чтобы подтвердить согласие. Мы проделывали этот процесс много раз, и процент успеха довольно высок.

Разработка и валидация аналитического метода
При настройке метода ВЭЖХ или ЖХ-МС необходим контроль примесей для локализации, разделения, проверки линейного диапазона и восстановления. Без контроля в проверке метода отсутствует часть. Многие клиенты просят нас сначала внести несколько ключевых примесей, чтобы настроить метод, а затем постепенно доработать все остальное.

Гетерогенная масс-спектрометрия
При декларировании дженерика требуется комплексный качественный и количественный анализ технологических примесей и продуктов деградации. Местоположение, содержание и структура каждой примеси должны быть подтверждены контрольным продуктом. Мы видели, что декларация информации была отправлена ​​для составления, в девяти случаях из десяти примеси этой части не понимались.

Исследования стабильности
В ходе долгосрочного-тестирования стабильности и ускоренного тестирования необходимо определить, какие продукты деградации являются доминирующими и каковы тенденции в контенте. Благодаря контролю примесей можно точно определить количество и контролировать их. Когда клиент проверял стабильность препарата ритаглутида, было обнаружено, что пик разложения растет очень быстро в ускоренных условиях, поэтому мы проанализировали его с помощью МС и синтезировали для подтверждения структуры, а затем клиент с облегчением сообщил об этом нам.

Тестирование пакетного выпуска
После коммерциализации каждая партия АФИ или состава должна быть проверена на наличие рассматриваемого вещества. Контроль примесей является важным инструментом для тестирования выпуска. Без него нельзя сказать, кто пик и сколько он стоит.

Информация о декларациях на непатентованные лекарственные средства
Исследования примесей являются ключевым разделом регистрационной информации. Предоставление полного анализа профиля примесей и контрольных данных может значительно снизить риск оценки вопроса о компенсации. Эксперт, который декларирует информацию, дает вам полный набор продуктов для контроля примесей, полные данные и многое другое.

Случай 1: фармацевтическая компания, программа создания генерических препаратов ритаглутида.
Они разрабатывают непатентованную версию ритаглутида, и для валидации метода им необходим полный набор средств контроля примесей. Для них мы подгоняли 8 примесей: 3 недостающих пептида, 2 окисленные примеси, 1 димер, 2 продукта отшелушивания жирных кислот. Чистота каждого из них превышала 95% по данным МС. Руководитель проекта сказал: «Мы не можем купить эти примеси и искали несколько компаний, которые не могут этого сделать. Но вы смогли произвести их все, и данные были полными, что очень помогло». Позже проверка их метода была успешно завершена, а также заполнена информация об объявлении.

Случай 2: Компания CRO, составление профиля примесей
Они предприняли проект качественного исследования реталутида, который потребовал всестороннего анализа технологических примесей. Они прислали нам образцы неочищенного пептида, и мы провели анализ ЖХ-МС, определили возможные структуры нескольких неизвестных примесей, затем целенаправленно синтезировали их, а затем сравнили время удерживания и масс-спектры, чтобы подтвердить наличие трех новых примесей. Клиент использовал эти данные для улучшения спектра примесей и передал приемку клиенту. Позже они попросили нас сделать примеси других видов.

Случай 3: Исследования стабильности, биотехнологическая компания
Они исследовали стабильность ритаглутида и обнаружили, что количество продукта разложения быстро увеличивается в ускоренных условиях, но они не знали, что это такое. Мы проанализировали образец методом ЖХ-МС и предположили, что это примесь дезамидирования в определенном сайте Asn, а затем целенаправленно синтезировали ее и подтвердили это путем сравнения. Они провели анализ с использованием этого контроля и точно отслеживали тенденцию разложения продукта. Когда был представлен окончательный отчет, данные были очень достоверными.

Реталутид — популярный продукт, но исследование примесей — деликатная задача. Отсутствующие пептиды, окисленные примеси, продукты отшелушивания жирных кислот требуют специального контроля для локализации и количественного определения. Если вы проводите качественные исследования или разрабатываете непатентованный ритаглутид и вам необходим контроль примесей, свяжитесь с нами. Мы проделали большую работу, знаем, какие примеси сложные, и знаем, как их разобрать.